科學(xué)識(shí)別超濾離心管出現(xiàn)的問(wèn)題并采取針對(duì)性措施是實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定的關(guān)鍵
點(diǎn)擊次數(shù)：37 更新時(shí)間：2026-01-07
超濾離心管是一種集離心與分子篩分功能于一體的實(shí)驗(yàn)室耗材，廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)濃縮、脫鹽、緩沖液置換及核酸純化等生物化學(xué)操作。其核心為內(nèi)置截留分子量的超濾膜，通過(guò)離心力驅(qū)動(dòng)小分子透過(guò)膜而大分子被截留。盡管操作簡(jiǎn)便，但在實(shí)際使用中可能會(huì)因選型錯(cuò)誤、操作不當(dāng)或保存不善導(dǎo)致回收率低、堵塞、破裂或交叉污染等問(wèn)題，嚴(yán)重影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?？茖W(xué)識(shí)別超濾離心管出現(xiàn)的問(wèn)題并采取針對(duì)性措施，是實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期穩(wěn)定過(guò)濾的關(guān)鍵。
一、濃縮效率低或無(wú)法濃縮
原因：膜孔徑（MWCO）選擇過(guò)大、樣品黏度過(guò)高、離心參數(shù)不足。
解決方法：
確保目標(biāo)分子量≥2–3倍MWCO（如50kDa蛋白應(yīng)選10K或30K管）；
高黏度樣品（如細(xì)胞裂解液）先低速預(yù)離心去除碎片，或稀釋后處理；
按說(shuō)明書設(shè)置離心力（通常1,000–14,000×g）和時(shí)間，避免過(guò)低轉(zhuǎn)速導(dǎo)致通量不足。
二、濾膜堵塞或流速驟降
原因：樣品含顆粒雜質(zhì)、脂質(zhì)或高濃度蛋白聚集。
解決方法：
上樣前用0.45μm或0.22μm濾器預(yù)過(guò)濾；
對(duì)含脂樣品，加入適量去垢劑（如0.1%Tween-20）減少膜吸附；
采用“間歇離心法”：離心5分鐘→暫停1–2分鐘→再離心，緩解濃差極化。
三、目標(biāo)物回收率低
原因：非特異性吸附、膜結(jié)合、殘留體積過(guò)大。
解決方法：
選用低吸附型超濾管（如帶親水涂層的RC膜）；
濃縮后用少量原緩沖液反向洗滌濾膜上表面，提高洗脫率；
選擇“死體積”小的型號(hào)（部分產(chǎn)品可低至<5μL），減少樣品滯留。
四、離心管破裂或漏液
原因：超速離心、管體老化、未配平。
解決方法：
嚴(yán)格遵守離心力限制（標(biāo)注于管壁），切勿超限使用；
檢查管體是否有劃痕、白化或脆化，一次性耗材禁止重復(fù)高壓滅菌；
離心前務(wù)必對(duì)稱配平（質(zhì)量差≤0.1g），使用適配套管。
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